విషయము

• స్టెప్స్
• చిట్కాలు
• హెచ్చరికలు
• అవసరమైన పదార్థాలు

కణజాల నమూనాలలో బ్యాక్టీరియా ఉనికిని గుర్తించడానికి మరియు కణ గోడల యొక్క రసాయన మరియు భౌతిక లక్షణాల ఆధారంగా గ్రామ్-పాజిటివ్ లేదా గ్రామ్-నెగటివ్ వంటి బ్యాక్టీరియాను వర్గీకరించడానికి గ్రామ్ స్టెయినింగ్ అనేది ఒక శీఘ్ర ప్రక్రియ. ఈ మరక దాదాపు ఎల్లప్పుడూ బ్యాక్టీరియా సంక్రమణను నిర్ధారించడానికి మొదటి దశగా చేయాలి.

ఈ విధానానికి డానిష్ శాస్త్రవేత్త హన్స్ క్రిస్టియన్ గ్రామ్ (1853 - 1938) పేరు పెట్టారు, అతను 1882 లో సాంకేతికతను అభివృద్ధి చేసి 1884 లో ప్రచురించాడు, ఇలాంటి క్లినికల్ లక్షణాలతో రెండు రకాల బ్యాక్టీరియా మధ్య తేడాను గుర్తించే ప్రక్రియగా: స్ట్రెప్టోకోకస్ న్యుమోనియా (దీనిని న్యుమోకాకస్ అని కూడా పిలుస్తారు) మరియు క్లేబ్సియెల్లా న్యుమోనియా.

స్టెప్స్

3 యొక్క 1 వ భాగం: స్లయిడ్‌ను సిద్ధం చేస్తోంది

1. 

   
   
   ప్రయోగశాల పనికి సిద్ధంగా ఉండండి. పరీక్షించాల్సిన నమూనాను కలుషితం చేయకుండా ఉండటానికి చేతి తొడుగులు వేసి, పొడవాటి జుట్టును వెనుకకు కట్టుకోండి. రసాయన ఫ్యూమ్ హుడ్ కింద లేదా బాగా వెంటిలేషన్ చేయబడిన ప్రదేశంలో వర్క్‌స్పేస్‌ను క్రిమిసంహారక చేయండి మరియు మీరు ప్రారంభించడానికి ముందు బన్సెన్ బర్నర్ మరియు మైక్రోస్కోప్ పనిచేస్తుందో లేదో చూడండి.

2. 

   గ్లాస్ మైక్రోస్కోప్ స్లైడ్‌ను క్రిమిరహితం చేయండి. బ్లేడ్ మురికిగా ఉంటే, గ్రీజు మరియు ధూళిని తొలగించడానికి సబ్బు మరియు నీటితో కడగాలి. ఇథనాల్, గ్లాస్ క్లీనర్ లేదా మీ ప్రయోగశాల సిఫార్సు చేసిన పద్ధతిని ఉపయోగించి దాన్ని క్రిమిసంహారక చేయండి.

3. 

   
   
   నమూనాను స్లైడ్‌లో ఉంచండి. పెట్రీ డిష్‌లో పెరిగిన వైద్య నమూనాలలో లేదా బ్యాక్టీరియా సంస్కృతులలో ఉన్న బ్యాక్టీరియాను గుర్తించడంలో మీరు గ్రామ్ స్టెయిన్ పద్ధతిని ఉపయోగించవచ్చు. పద్ధతి ఉపయోగకరంగా ఉండటానికి, ఒక పొరను ఉంచండి slim స్టెయిన్లో నమూనా. పాత బ్యాక్టీరియా కణ గోడలను దెబ్బతీసినందున 24 గంటల కన్నా తక్కువ వయస్సు గల నమూనాను ఉపయోగించమని సిఫార్సు చేయబడింది, ఇవి ప్రక్రియకు తక్కువ స్పందించగలవు.
   • మీరు కణజాల నమూనాను ఉపయోగించబోతున్నట్లయితే, స్లైడ్‌లో ఒకటి నుండి రెండు చుక్కలను ఉంచండి మరియు సమానంగా వ్యాపించి రెండవ శుభ్రమైన గాజు స్లైడ్‌ను ఉపయోగించి చక్కటి మరకను ఏర్పరుస్తుంది. కొనసాగే ముందు పొడిగా గాలిని అనుమతించండి.
   • మీరు పెట్రీ డిష్ నుండి బ్యాక్టీరియాను ఉపయోగిస్తుంటే, బన్సెన్ బర్నర్‌లో టీకాలు వేసే లూప్‌ను మెరుస్తున్నంత వరకు క్రిమిరహితం చేసి, ఆపై చల్లబరచండి. స్లైడ్‌లో ఒక చుక్క స్వేదనజలం ఉంచడానికి దాన్ని వాడండి, ఆపై బ్యాక్టీరియా యొక్క చిన్న నమూనాను బదిలీ చేసి, నీటిలో మెత్తగా కలపడానికి ముందు హ్యాండిల్‌ను మళ్లీ క్రిమిరహితం చేసి ఆరబెట్టండి.
   • ఉడకబెట్టిన పులుసులోని బ్యాక్టీరియాను ఒక షేకర్‌పై కలిపి, ఆపై ఎక్కువ నీరు కలపకుండా, పైన చెప్పిన విధంగా టీకాలు వేసే లూప్‌తో కలపాలి.
   • మీకు శుభ్రముపరచు నమూనా ఉంటే, శుభ్రముపరచును బ్లేడ్ అంతటా సున్నితంగా చుట్టండి.

4. 

   
   
   వేడిని ఉపయోగించి మరకను పరిష్కరించండి. స్లైడ్‌లోని బ్యాక్టీరియాను వేడిచేస్తుంది, తద్వారా అవి మరక సమయంలో తేలికగా కడిగివేయబడవు. బన్సెన్ బర్నర్ యొక్క మంట ద్వారా రెండు లేదా మూడు సార్లు త్వరగా బ్లేడ్ను పాస్ చేయండి లేదా ఎలక్ట్రిక్ బ్లేడ్ హీటర్ మీద వేడి చేయండి. దీన్ని అతిగా చేయవద్దు, లేదా మీరు నమూనాలను వక్రీకరించవచ్చు. బన్సెన్ బర్నర్ ఉపయోగిస్తుంటే, మంట చిన్న, నీలం రంగు కోన్ అయి ఉండాలి, పొడవైన, నారింజ మంట కాదు.
   • ప్రత్యామ్నాయంగా, మీరు పొడి మరకకు ఒకటి నుండి రెండు చుక్కల మిథనాల్ జోడించడం ద్వారా, అదనపు ఉత్పత్తిని తొలగించి, గాలిని పొడిగా అనుమతించడం ద్వారా మరకను పరిష్కరించవచ్చు. ఈ పద్ధతి హోస్ట్ కణాలకు నష్టాన్ని తగ్గిస్తుంది, ఇది క్లీనర్ నేపథ్యాన్ని ఇస్తుంది.

5. 

   స్లైడ్‌ను మరక ట్రేలో ఉంచండి. ఇది ఒక చిన్న తెర లేదా వైర్ మద్దతుతో ఫ్లాట్ మెటల్, గాజు లేదా ప్లాస్టిక్ ప్లేట్ కలిగి ఉంటుంది. ఈ మద్దతుపై బ్లేడ్ ఉంచండి, తద్వారా మీరు ఉపయోగించే ద్రవాలు ట్రేలోకి పోతాయి.
   • మీకు కలరింగ్ ట్రే లేకపోతే, స్లైడ్‌ను నేరుగా ప్లాస్టిక్ ఐస్ షీట్‌లో ఉంచవచ్చు.

3 యొక్క 2 వ భాగం: గ్రామ్ స్టెయిన్ చేయడం

1. 

   స్టెయిన్‌ను జెంటియన్ వైలెట్‌తో నానబెట్టండి. బ్యాక్టీరియా నమూనాను జెంటియన్ వైలెట్ యొక్క అనేక చుక్కలతో నానబెట్టడానికి పైపెట్ ఉపయోగించండి, కొన్నిసార్లు దీనిని క్రిస్టల్ వైలెట్ లేదా మిథైల్ వైలెట్ అని పిలుస్తారు. 30 నుండి 60 సెకన్లు వేచి ఉండండి. జెంటియన్ వైలెట్ సజల ద్రావణాలలో విడదీసి, CV + మరియు క్లోరిన్ (Cl–) ను ఏర్పరుస్తుంది. ఈ అయాన్లు గ్రామ్-పాజిటివ్ మరియు గ్రామ్-నెగటివ్ కణాల గోడ మరియు పొరలోకి చొచ్చుకుపోతాయి. CV + అయాన్ బ్యాక్టీరియా కణాల యొక్క ప్రతికూలంగా చార్జ్ చేయబడిన భాగాలతో సంకర్షణ చెందుతుంది.
   • అవపాతం నివారించడానికి చాలా ప్రయోగశాలలు అమ్మోనియం ఆక్సలేట్‌తో జెంటియన్ వైలెట్‌ను ఉపయోగిస్తాయి.

2. 

   జెంటియన్ వైలెట్ ను మెత్తగా శుభ్రం చేసుకోండి. బ్లేడ్ మీద వంగి, స్ప్లాష్ ఉపయోగించి బ్లేడ్ మీద కొద్దిగా కుళాయి లేదా స్వేదనజలం పోయాలి. నీరు తప్పనిసరిగా మరక యొక్క ఉపరితలం గుండా వెళ్ళాలి, కాని దానిపై నేరుగా పోయకూడదు. గ్రామ్-పాజిటివ్ బ్యాక్టీరియాను మరక చేయకుండా ఉండటానికి ఎక్కువగా కడగకండి.

3. 

   స్టెయిన్‌ను అయోడిన్‌తో నానబెట్టి శుభ్రం చేసుకోండి. అయోడిన్‌తో మరకను కప్పడానికి పైపెట్‌ను ఉపయోగించండి మరియు కనీసం 60 సెకన్లపాటు పనిచేయనివ్వండి. అప్పుడు అదే పద్ధతిలో జాగ్రత్తగా శుభ్రం చేసుకోండి. అయోడిన్, ప్రతికూలంగా చార్జ్ చేయబడిన అయాన్ల రూపంలో, సివి + తో సంకర్షణ చెందుతుంది, సెల్ యొక్క లోపలి మరియు బయటి పొరలలో జెంటియన్ వైలెట్ మరియు అయోడిన్ (సివి - ఐ కాంప్లెక్స్) యొక్క పెద్ద కాంప్లెక్స్‌లను ఏర్పరుస్తుంది, వైలెట్ రంగు ఎక్కడ ఉన్నా ట్రాప్ చేస్తుంది.
   • అయోడిన్ తినివేయు. చర్మంతో పీల్చడం, తీసుకోవడం లేదా సంపర్కం మానుకోండి.

4. 

   బ్లీచ్ వేసి త్వరగా శుభ్రం చేసుకోండి. ఈ క్లిష్టమైన దశ కోసం అసిటోన్ మరియు ఇథనాల్ యొక్క 1-నుండి -1 మిశ్రమం తరచుగా ఉపయోగించబడుతుంది, ఇది జాగ్రత్తగా సమయం ముగియాలి. బ్లేడ్‌ను ఒక కోణంలో పట్టుకుని, బయటకు వచ్చే ద్రవంలో వైలెట్ కనిపించని వరకు బ్లీచ్‌ను జోడించండి. బ్లీచ్‌లో అసిటోన్ అధిక సాంద్రతలు ఉంటే ఈ ప్రక్రియ సాధారణంగా 10 సెకన్లు లేదా అంతకంటే తక్కువ సమయం పడుతుంది. వెంటనే ఆపు లేదా బ్లీచ్ సానుకూల మరియు ప్రతికూల కణాల నుండి జెంటియన్ వైలెట్ మరకను తొలగిస్తుంది, ఇది పరీక్షను పునరావృతం చేస్తుంది. మునుపటి టెక్నిక్ ఉపయోగించి వెంటనే శుభ్రం చేసుకోండి.
   • మిశ్రమం స్థానంలో స్వచ్ఛమైన అసిటోన్ (> 95%) ఉపయోగించవచ్చు. మరింత అసిటోన్, వేగంగా బ్లీచ్ పనిచేస్తుంది, సమయం యొక్క మరింత ఖచ్చితమైన నియంత్రణ అవసరం.
   • ఈ దశలో మీకు టైమింగ్ సమస్య ఉంటే, బ్లీచ్ డ్రాప్‌ను డ్రాప్ ద్వారా జోడించడాన్ని పరిగణించండి.

5. 

   స్టెయిన్‌ను కాంట్రాస్ట్ డైతో నానబెట్టి శుభ్రం చేసుకోండి. కాంట్రాస్ట్ డై, సాధారణంగా సఫ్రానిన్ లేదా ఫుచ్సిన్, రంగులేని (గ్రామ్-నెగటివ్) పింక్ లేదా ఎరుపు బ్యాక్టీరియా రంగు వేయడం ద్వారా గ్రామ్-పాజిటివ్ మరియు గ్రామ్-నెగటివ్ బ్యాక్టీరియా మధ్య అదనపు వ్యత్యాసాన్ని జోడించడానికి ఉపయోగిస్తారు. కనీసం 45 నిమిషాలు వదిలి శుభ్రం చేసుకోండి.
   • ఫుచ్సిన్ అనేక గ్రామ్-నెగటివ్ బ్యాక్టీరియాను రంగు చేస్తుంది హేమోఫిలస్ ఎస్పిపి మరియు legionella spp, మరింత తీవ్రంగా, ఇది ప్రారంభకులకు మంచి ఎంపిక.

6. 

   బ్లేడ్ ఆరబెట్టండి. మీరు దానిని గాలిలో ఆరబెట్టడానికి అనుమతించవచ్చు లేదా ఈ ప్రయోజనం కోసం అమ్మిన బ్లాటింగ్ కాగితాన్ని ఉపయోగించి నొక్కండి. గ్రామ్ మరక ముగిసింది.

3 యొక్క 3 వ భాగం: ఫలితాన్ని పరిశీలిస్తోంది

1. 

   ఆప్టికల్ మైక్రోస్కోప్‌ను సిద్ధం చేయండి. స్లైడ్‌ను సూక్ష్మదర్శిని క్రింద ఉంచండి. బాక్టీరియా పరిమాణంలో విస్తృతంగా మారవచ్చు, కాబట్టి అవసరమైన మొత్తం మాగ్నిఫికేషన్ 400x నుండి 1000x వరకు ఉంటుంది. అధిక మాగ్నిఫికేషన్ విలువల వద్ద, స్పష్టత కోసం నూనెలో ముంచిన ఆబ్జెక్టివ్ లెన్స్‌ను ఉపయోగించమని సిఫార్సు చేయబడింది. బుడగలు నివారించడానికి అప్లికేషన్ సమయంలో ఎక్కువ కదలికలు చేయకుండా, బ్లేడ్‌లో ఒక చుక్క ఇమ్మర్షన్ ఆయిల్ ఉంచండి. మైక్రోస్కోప్ రివాల్వర్‌ను తరలించండి, తద్వారా ఆబ్జెక్టివ్ లెన్స్ చమురును తాకుతుంది.
   • ఆయిల్ ఇమ్మర్షన్ ప్రత్యేక కటకములలో మాత్రమే ఉపయోగించబడుతుంది, "పొడి" లెన్సులు కాదు.

2. 

   గ్రామ్-పాజిటివ్ మరియు గ్రామ్-నెగటివ్ బ్యాక్టీరియాను గుర్తించండి. సూక్ష్మదర్శిని క్రింద స్లయిడ్‌ను పరిశీలించండి; జెంటియన్ వైలెట్ మందపాటి సెల్ గోడలలో చిక్కుకోవడం వల్ల గ్రామ్-పాజిటివ్ బ్యాక్టీరియా ple దా రంగులో ఉంటుంది. గ్రామ్-నెగెటివ్స్ ఎరుపు లేదా గులాబీ రంగులో ఉంటాయి, ఎందుకంటే వైలెట్ సన్నని సెల్ గోడల ద్వారా కడుగుతారు మరియు తరువాత పింక్ కాంట్రాస్ట్ డై వాటి ద్వారా ప్రవేశిస్తుంది.
   • నమూనా చాలా మందంగా ఉంటే, మీరు తప్పుడు పాజిటివ్లను చూడవచ్చు. అన్ని రకాల బ్యాక్టీరియా గ్రామ్-పాజిటివ్ అయితే, ఫలితాన్ని నిర్ధారించడానికి పరీక్షను మరొక నమూనాతో పునరావృతం చేయండి.
   • బ్లీచ్ చాలా పొడవుగా పనిచేస్తుంటే, మీరు తప్పుడు ప్రతికూలతలను చూడవచ్చు. అన్ని రకాల బ్యాక్టీరియా గ్రామ్-నెగటివ్ అయితే, ఫలితాన్ని నిర్ధారించడానికి మరొక నమూనాతో పరీక్షను పునరావృతం చేయండి.

3. 

   సూచన చిత్రాల కోసం చూడండి. బాక్టీరియం ఎలా ఉంటుందో మీకు తెలియకపోతే, ఫార్మాట్ నిర్వహించిన రిఫరెన్స్ చిత్రాల సమాహారం మరియు గ్రామ్ స్టెయిన్ ఫలితం చూడండి. మీరు అమెరికన్ డేటాబేస్లను అమెరికన్ మైక్రోబియల్ పాథోజెన్ డేటాబేస్, ఫోటోలలో బాక్టీరియా మరియు అనేక ఇతర సైట్లలో కనుగొనవచ్చు. గుర్తింపును సులభతరం చేయడానికి, స్థితి మరియు ఆకృతి ద్వారా రోగ నిర్ధారణ కోసం సాధారణ లేదా ముఖ్యమైన ఉదాహరణలను క్రింద జాబితా చేస్తాము.

4. 

   గ్రామ్-పాజిటివ్ బ్యాక్టీరియాను వాటి ఆకారం ద్వారా గుర్తించండి. సూక్ష్మదర్శిని క్రింద బాక్టీరియాను వాటి ఆకారం ద్వారా వర్గీకరిస్తారు, సాధారణంగా కొబ్బరికాయలు (గోళాకార) లేదా బాసిల్లి (స్థూపాకార). ఫార్మాట్ ద్వారా నిర్వహించబడే కొన్ని సాధారణ గ్రామ్-పాజిటివ్ బ్యాక్టీరియా ఇక్కడ ఉన్నాయి:
   • ది గ్రామ్ పాజిటివ్ కొబ్బరికాయలు సాధారణంగా ఉంటాయి స్టెఫలోసి (సమూహాలలో కొబ్బరికాయలు) లేదా స్ట్రెప్టోకాకి (గొలుసు కొబ్బరికాయలు).
   • ది గ్రామ్-పాజిటివ్ బాసిల్లి ఉన్నాయి బాసిల్లస్, క్లోస్ట్రిడియం, కొరీనెబాక్టీరియం మరియు లిస్టీరియా. బాసిల్లి ఆక్టినోమైసెస్ spp. తరచుగా కొమ్మలు లేదా తంతువులు ఉంటాయి.

5. 

   గ్రామ్-నెగటివ్ బ్యాక్టీరియాను గుర్తించండి. గ్రామ్-నెగటివ్స్ (పింక్) తరచుగా మూడు గ్రూపులుగా వర్గీకరించబడతాయి: కొబ్బరికాయలు గోళాకారంగా ఉంటాయి, బాసిల్లి పొడవుగా మరియు సన్నగా ఉంటాయి మరియు కోకోయిడ్ బాసిల్లి మధ్యలో ఉంటాయి.
   • ది గ్రామ్-నెగటివ్ కొబ్బరికాయలు సర్వసాధారణం మెదడు spp.
   • ది గ్రామ్-నెగటివ్ బాసిల్లి ఉన్నాయి ఇ. కోలి, ఎంటరోబాక్టర్, క్లేబ్సియెల్లా, Citrobacter, సేర్రాషియ, ప్రోట్యూస్, సాల్మోనెల్లా, షిగెల్ల, సూడోమోనాస్ మరియు అనేక ఇతరులు. బాక్టీరియం విబ్రియో కలరా ఇది సాధారణ లేదా వంగిన బాసిల్లి లాగా ఉంటుంది.
   • ది గ్రామ్-నెగటివ్ కోకోయిడ్ బాసిల్లి (లేదా "కోకోబాసిల్లి") ఉన్నాయి Bordetella, బ్రూసెల్లా, హెమోఫిలస్ మరియు Pasteurella.

6. 

   మిశ్రమ ఫలితాలను అంచనా వేయండి. కణ గోడల పెళుసుదనం లేదా మైనపు రూపాన్ని బట్టి కొన్ని బ్యాక్టీరియా రంగులు వేయడం కష్టం. వారు ఒకే కణంలో pur దా లేదా గులాబీ మిశ్రమాన్ని కలిగి ఉండవచ్చు లేదా ఒకే నమూనాలోని వివిధ కణాల మధ్య ఉండవచ్చు. 24 గంటల కంటే పాత బ్యాక్టీరియా యొక్క ఏదైనా నమూనా ఈ సమస్యను కలిగి ఉంటుంది, అయితే కొన్ని జాతులు ఏ వయస్సులోనైనా రంగు వేయడం కష్టం మరియు గుర్తింపును తగ్గించడానికి మరింత ప్రత్యేకమైన పరీక్షలు అవసరం, జీహెల్-నీల్సన్ టెక్నిక్, సంస్కృతి పెరుగుదలను పరిశీలించడం, TSI అగర్ లేదా జన్యు పరీక్ష.
   • వాటితో, Arthobacter, కొరీనెబాక్టీరియం, మైకోబాక్టీరియం మరియు ప్రొపియోనిబాక్టీరియం ఎస్.పి.పి. అవన్నీ గ్రామ్-పాజిటివ్ బ్యాక్టీరియాగా పరిగణించబడతాయి, కాని అవి తరచూ ఆ పరీక్షలో నిశ్చయాత్మక ఫలితాలను ఇవ్వవు.
   • వంటి చిన్న, సన్నని బ్యాక్టీరియా ట్రెపోనెమ, క్లమిడియా మరియు పేలు, తుళ్ళు పురుగులు ద్వారా మనిషికి సోకి టైఫన్ జ్వరాన్ని కలిగించు ఒక ప్రజాతి సూక్ష్మజీవులు spp. ఈ పద్ధతిని ఉపయోగించి సరిగ్గా రంగు వేయడం కష్టం.

7. 

   పదార్థాలను వదిలించుకోండి. ప్రయోగశాల మరియు ఉపయోగించిన పదార్థాలను బట్టి వ్యర్థాల తొలగింపు విధానాలు మారుతూ ఉంటాయి. సాధారణంగా, మరక ట్రేలోని ద్రవాన్ని ప్రమాదకర వ్యర్థంగా సీలు చేసిన సీసాలలో విస్మరిస్తారు. 10% బ్లీచ్ ద్రావణంలో బ్లేడ్లను ముంచి, ఆపై పదునైన పదార్థాల పారవేయడం కోసం వాటిని కంటైనర్లలో విసిరేయండి.

చిట్కాలు

• గ్రామ్ స్టెయిన్ ఫలితం నమూనా వలె మంచిదని గుర్తుంచుకోండి. మంచి నమూనాలను చూపించడానికి రోగులకు నేర్పించడం చాలా ముఖ్యం, ఉదాహరణకు, కఫం నమూనాలలో ఒక ఉమ్మి మరియు లోతైన కఫం మధ్య వ్యత్యాసం.
• బ్లీచ్‌గా, ఇథనాల్ అసిటోన్ కంటే నెమ్మదిగా పనిచేస్తుంది.
• ప్రామాణిక ప్రయోగశాల జాగ్రత్తలు పాటించండి.
• ప్రాక్టీస్ చేయడానికి శుభ్రముపరచు నమూనాను ఉపయోగించండి, ఎందుకంటే ఇందులో గ్రామ్-పాజిటివ్ మరియు గ్రామ్-నెగటివ్ బ్యాక్టీరియా ఉండాలి. మీరు ఒక రకాన్ని లేదా మరొకదాన్ని మాత్రమే చూస్తే, మీరు బహుశా చాలా ఎక్కువ లేదా చాలా తక్కువ బ్లీచ్ ఉపయోగిస్తున్నారు.
• బ్లేడ్ తీయటానికి మీరు స్ప్రింగ్-లోడెడ్ చెక్క బట్టల పిన్ను ఉపయోగించవచ్చు.

హెచ్చరికలు

• అసిటోన్ మరియు ఇథనాల్ మంటగలవి మరియు పూర్వం మీ చేతి నుండి నూనెలను తొలగిస్తుంది, మీ చర్మం ఇతర రసాయన భాగాలను మరింత సులభంగా గ్రహిస్తుంది. కాబట్టి, చేతి తొడుగులు ధరించి జాగ్రత్తగా ఉండండి.
• మీరు స్టెయిన్ లేదా స్టెయిన్ శుభ్రం చేయడానికి ముందు నమూనా పొడిగా ఉండనివ్వవద్దు.

అవసరమైన పదార్థాలు

• ఫాబ్రిక్ నమూనా
• గ్లాస్ స్లైడ్లు
• పిప్పెట్
• మంట యొక్క మూలం, బ్లేడ్ హీటర్ లేదా మిథనాల్
• నీటి
• జెంటియన్ వైలెట్
• అయోడిన్
• ఆల్కహాల్ లేదా అసిటోన్ వంటి బ్లీచింగ్ ఏజెంట్
• Safranina